天然药物化学
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任务2.3 糖类和苷类的提取分离

2.3.1 糖类的提取分离

糖类是极性较大的成分,能溶于水和稀醇,不溶于极性小的溶剂,从中药中提取单糖和低聚糖时,常用水或稀醇作为提取溶剂进行提取。由于多种物质共存的助溶作用,用乙醇(甲醇)回流提取也可提出单糖和一些低聚糖。若共存有酸性成分,还应用碳酸钙、碳酸钠等中和,尽量在中性条件下提取。

从中药中提取单糖及低聚糖的一般方法如下:

多糖常与其他成分共存于中药中,可利用多糖溶于水不溶于乙醇的性质,用水作提取溶剂加热提取,再将水提液浓缩后加乙醇、甲醇或丙酮使多糖从提取液中沉淀出来,达到初步纯化的目的。根据多糖的具体性质的不同,有的也可用稀醇、稀碱、稀盐溶液或二甲基亚砜提取。多糖的分离纯化目前多采用凝胶滤过色谱法较为理想,分子大小不同的多糖在分离过程中不断扩散和排阻,大分子多糖先流出,小分子多糖后流出。常用的葡聚糖凝胶有Sephadex G-50、G-75、G-150等。另外纤维素阴离子交换树脂法也是较为常用的方法。

2.3.2 苷类的提取分离

(1)苷类的提取

在植物体内苷类常与能水解苷的酶共存于不同的细胞中,因此在提取苷时必须明确提取的目的要求,即要求提取的是原生苷、次生苷,还是苷元,然后,根据要求进行提取。若提取原生苷必须设法抑制或破坏酶的活性,常用的方法有:①在中药中加入一定量的碳酸钙;②采用甲醇、乙醇或沸水提取;③在提取过程中还须尽量勿与酸和碱接触,以免苷类为酸和碱水解,否则,得到的不是原生苷而是已水解失去一部分糖的次生苷,甚至是苷元。若提取次生苷,要注意保持酶的活性,可将原料用35℃左右的温水搅匀后放置24h,使其原生苷被酶水解。工业上也可用发酵的方法来达到酶解的目的。

各种苷类分子中,由于苷元结构的不同,所连接糖的数目和种类也不一样,很难有统一的提取方法,如果用极性不同的溶剂按极性由小到大次序进行提取,则在每一提取部分,都可能有苷的存在。苷类的系统溶剂提取流程如下:

(2)苷类的分离

苷类是极性较大的成分类型,且基本上是非结晶性物质,分离较为困难,在提取后一般先经初步精制除去大量杂质,再用色谱法分离。

初步精制的方法有溶剂法和大孔树脂法。溶剂法是将粗提物溶于少量甲醇(水),再滴加丙酮(或乙醚),使苷类沉淀析出而精制。大孔树脂法是将粗提物溶于水,上孔树脂柱,先用水洗去无机盐、糖、肽类等水溶性成分,再用逐步增加浓度的稀醇洗脱苷类,此法也可用于苷类的分离。

苷类的分离一般要综合应用各种色谱法,包括高效液相色谱等,才能彼此分离。常用的有硅胶、反相硅胶、葡聚糖凝胶、活性炭、纤维素、聚酰胺、离子交换树脂等色谱材料。